blízko
Vyberte si svůj web
Globální
Sociální média
Zobrazení: 5210 Autor: Editor webů Publikování Čas: 2025-06-19 Původ: Místo
Umožňuje vám spektrofotometr Změřte, kolik světla se vzorek absorbuje při určité vlnové délce. Když používáte spektrofotometrii, získáte dovednosti, které pomáhají v mnoha vědeckých oborech. Tato příručka usnadňuje spektroskopii tím, že vám ukáže, jak používat výukové nástroje a skutečné experimenty. Uvidíte, že výuka s podporou spektrofotometru Přesné výsledky , nedestruktivní testy a praktické učení spektroskopie. Výuka studentů Spektroskopie vám pomůže prozkoumat chemii, environmentální vědu a další. Spektrofotometrie a spektroskopie hrají klíčové role ve výuce základů vědy.
Spektrofotometr měří, kolik světla se vzorek absorbuje, což vám pomůže snadno a přesně najít chemické koncentrace.
Správné nastavení, kalibrace a příprava vzorku jsou nezbytné pro získání spolehlivých a konzistentních výsledků z vašeho spektrofotometru.
Používejte čisté, čisté kyvety a pečlivě je manujte, abyste se vyhnuli chybám způsobeným otisky prstů nebo škrábanců.
Sledujte bezpečnostní pravidla, jako je nošení brýlí a rukavic, a udržujte svůj pracovní prostor v čistotě, abyste chránili sebe a svá data.
Naučte se pečlivě číst hodnoty absorbance a spektra, zkontrolujte hladké křivky a očekávané vrcholy a řešení běžných problémů pro zlepšení vašich experimentů.
Spektrofotometrie je metoda, kterou používáte Změřte, kolik světla látka absorbuje . Když svítíte roztokem, prochází část světla a některé se absorbují molekulami uvnitř. Tento proces vám pomůže zjistit, kolik určité chemikálie je přítomna. Spektrofotometrie pracuje s různými typy světla, včetně UV-vis a infračervených. Můžete jej použít ke studiu mnoha věcí, jako je množství cukru v nápoji nebo koncentraci léku. Hlavní myšlenka je jednoduchá: čím více molekul, které absorbují světlo, tím méně světla vychází druhá strana.
Spektrofotometrie vám dává způsob, jak shromažďovat kvantitativní data. Například můžete Změřte koncentrace z mikrogramů na gramy na deciliter . Díky tomu je užitečný v chemii, biologii a dokonce i klinických laboratořích.
Spektrofotometr je nástroj, který používáte pro spektrofotometrii. Svítí světlo na konkrétní vlnovou délku skrz vzorek. Uvnitř nástroje najdete a Světelný zdroj, monochromátor, který si vybere správnou vlnovou délku, kyveta, která drží vzorek, a detektor, který měří, kolik světla prochází. Detektor vám ukáže, kolik světla se vzorek absorbuje. Pokud má váš vzorek chromofor, absorbuje světlo na určitých vlnových délkách, které může spektrofotometr detekovat.
Přístroj měří absorpci světla i přenos.
Hodnota absorbance vám řekne, kolik světla se vzorek absorbuje.
Hodnota přenosu ukazuje, kolik prochází světlo.
Zde je tabulka ukazující, jak Absorbance a přenos se vztahují : Absorbance
| přenosu (%) | (A) |
|---|---|
| 100 | 0 |
| 50 | 0.301 |
| 10 | 1.0 |
| 5 | 1.301 |
| 1 | 2.0 |
| 0.1 | 3.0 |
V mnoha vědeckých oborech používáte spektrofotometrii a spektroskopii. V UV-vis spektroskopii můžete studovat, jak chromofory ve vzorku absorbují světlo na různých vlnových délkách. To vám pomůže analyzovat chemické složení a pokrok reakce. Umožňuje vám spektrofotometrie Změřte věci, jako je enzymatická aktivita, kvalita potravin a dokonce i markery nemoci v krvi. Ve třídě, s použitím UV-vis spektrofotometrie spojuje to, co se teoreticky učíte se skutečnými experimenty . Získáte praktickou praxi a uvidíte, jak se absorpce světla mění s různými vzorky.
Spektroskopie a spektrofotometrie činí vědu interaktivnější.
Naučíte se, jak používat skutečné nástroje a porozumět datům.
Tyto dovednosti vám pomáhají v chemii, biologii a vědě o materiálech.
K zahájení experimentu UV-vis potřebujete silný zdroj světla. Zdroj světla svítí váš vzorek a pokrývá široké spektrum. Různé lampy fungují pro různé části spektra. Například, Lampy deuteria pokrývají UV rozsah od 190 do 370 nm , zatímco wolframové halogenové lampy fungují pro viditelné spektrum od 320 do 1100 nm. Xenonové flash lampy a LED diody mohou pokrýt UV i viditelné rozsahy. Monochromátor rozdělí světlo na úzký pás, takže si můžete vybrat přesnou vlnovou délku, kterou chcete studovat ve spektru. The Šířka štěrbiny monochromátoru ovládá, jak se objeví vaše spektrum . Úzké štěrbiny vám dávají lepší rozlišení, ale méně světlé. Širší štěrbiny pustily více světla, ale spektrum je méně jasné. Zde je tabulka ukazující některé běžné technické údaje: Specifikace
| komponent | / Numerická data |
|---|---|
| Světelné zdroje | Deuterium: UV (190–370 nm), Lifetime ~ 100 hodin |
| Wolfram halogen: vis (320–1100 nm), životnost ~ 3000 hodin | |
| Xenon flash lampy: UV/VIS (190–1100 nm), Lifetime ~ 3000 HR | |
| LED diody: Stabilní spektrum, životnost> 100 000 hodin | |
| Monochromátory | K rozdělení vlnových délek světelných vlnových délek použijte hranoly nebo difrakční mřížky |
| Řezaní šířka řídí rozlišení | |
| Spektrální šířka pásma | Pevná nebo variabilní (např. 0,5 až 5 nm) |
Tip: Pro studie UV-Vis vždy zkontrolujte typ lampy a šířku štěrbin, aby odpovídaly potřebám vašeho spektra.
Umístíte vzorek do kyvety, která sedí v držáku vzorku. A, aby se prošel spektrum projít, musí být jasná. Pro měření UV-vis, Křemenné kyvety fungují nejlépe, protože nechaly UV světlo . Plastové nebo skleněné kyvety mohou blokovat části UV spektra, které mohou změnit vaše výsledky. Délka dráhy kyvety ovlivňuje to, kolik světla se vzorek absorbuje. Delší délky cesty zvyšují absorbanci, což pomáhá, když máte vzorek s nízkou koncentrací. Délka kratší cesty pomáhá, když je váš vzorek velmi koncentrovaný. Musíte také vyplnit kyvetu na pravou úroveň, takže spektrum prochází celým vzorkem. Pokud používáte nesprávnou kyvetu nebo ji naplníte nesprávně, vaše hodnoty spektrofotometru nebudou přesné.
Poté, co spektrum projde vaším vzorkem, detektor měří, kolik světla vyjde. Moderní spektrofotometry používají citlivé detektory, které mohou vyzvednout malé změny ve spektru. Tyto detektory fungují rychle a mohou měřit Změny malé absorbance, dokonce i nízké jako 0,0001 . Displej ukazuje vaše výsledky, často jako graf spektra nebo jako hodnoty absorbance při různých vlnových délkách. Ve spektru můžete vidět vrcholy, které vám říká o vzorku. Vysoce kvalitní detektory a displeje vám pomohou získat spolehlivá data UV-Vis. Když se zaměříte na pochopení instrumentace, můžete své výsledky věřit a rychle zjistit jakékoli problémy.
Než začnete jakýkoli experiment, musíte dodržovat bezpečnostní pravidla. Tato pravidla vás chrání a pomáhají vám získat spolehlivé výsledky. Při manipulaci s chemikáliemi nebo vzorky vždy noste bezpečnostní brýle a rukavice. Udržujte svůj pracovní prostor v čistotě a suchu. Nikdy nejezte ani nepijte poblíž spektrofotometru.
TIP: Zvládněte kyvety po matných stranách, aby se zabránilo otiskům prstů na čirých površích. Otisky prstů mohou změnit vaše hodnoty.
Pohled na laboratorní údaje ukazuje, proč záleží na bezpečnosti a správné technice. V testech z vysoké školy amerických patologů až do 22% změny hodnot absorbance . V laboratořích se objevilo I po odstranění laboratoří s vadným zařízením zůstala variace na 15%. Tato tabulka ukazuje čísla:
| Počet | laboratoří | Maximální variační koeficient (CV) v Absorbance (%) | Poznámky |
|---|---|---|---|
| 1973 | 132 | 22 | Počáteční test ukazující vysokou variabilitu |
| 1974 | 135 | 15 | Po vyloučení 24 laboratoří s> 1% bludným světlem |
| 1974 | 24 (vyloučené laboratoře) | Až 11 (životopis v propustnosti) | Laboratoře s> 1% bludným světlem způsobujícími chyby |
Tyto výsledky ukazují, že bezpečnost, správná kalibrace a pečlivá manipulace snižují chyby. Vždy sledujte průvodce svých učitelů nebo laboratorního vedoucího pro bezpečné použití spektrofotometru.
Než cokoli změříte, musíte nastavit a kalibrovat spektrofotometr. Tento krok zajišťuje, že vaše hodnoty jsou správné. Postupujte podle této příručky pro nastavení a kalibraci:
Zapněte spektrofotometr a nechte jej Zahřívejte nejméně 45 minut . To pomáhá stabilizovat nástroj.
Vyberte vlnovou délku, kterou potřebujete pro svůj experiment. Zkontrolujte příručku pro doporučené nastavení, například 465 nm.
Do držáku vzorku vložte mezeru (kyveta naplněná rozpouštědlem nebo pufrem). Zavřete víko a nastavte displej na nulu. Tento krok odstraňuje signály pozadí.
Vložte a Kalibrační standard , který odpovídá typu vzorku, který otestujete. Zaznamenejte čtení.
Porovnejte čtení s hodnotou na kalibračním certifikátu. Pokud se čísla neshodují, zkontrolujte toleranci nástroje a nejistotu standardu.
Pokud najdete problém, vyzkoušejte standard na jiném spektrofotometru, abyste zjistili, zda je problém s nástrojem nebo standardem.
Opakujte kalibraci nejméně každých osm hodin nebo když se teplota místnosti změní o více než 5 ° C.
Poznámka: Udržujte spektrofotometr od přímých změn slunečního světla a teploty. Stabilní podmínky vám pomohou získat přesné výsledky.
Dobrá příprava vzorku je klíčem k získání spolehlivých dat. Pro každý krok musíte dodržovat průvodce, abyste se vyhnuli chybám. Zde jsou osvědčené postupy pro přípravu vzorků:
Sbírejte svůj vzorek pomocí čistých nástrojů a kontejnerů.
Ukládejte vzorky na správnou teplotu a v případě potřeby je chráňte před světlem.
Homogenizujte vzorek tak, aby byl jednotný. Tento krok snižuje chyby.
Filtrujte nebo odstřeďujte vzorek, abyste odstranili částice, které by mohly blokovat světlo.
Upravte koncentraci tak, aby se vešly do rozsahu detekce spektrofotometru.
Pokud to váš experiment vyžaduje, nastavte pH.
K kontrole konzistence použijte mezery a duplikáty.
Napište každý krok do svého laboratorního notebooku.
TIP: Vždy používejte stejný typ kyvety pro všechny vzorky a polotovary. To udržuje vaše výsledky konzistentní.
Vědci zjistili, že pečlivá příprava, jako je filtrování a úprava koncentrace, vede k přesnějším a opakovanějším výsledkům. Kroky kontroly kvality, jako je použití mezer a duplikátů, vám pomohou včas spatřit problémy.
Nyní jste připraveni měřit svůj vzorek. Tato příručka vám pomůže získat nejlepší výsledky:
Otřete kyvetu tkáň bez vlákna, abyste odstranili prach nebo otisky prstů.
Umístěte kyvetu do držáku s čistými stranami směřujícími k světelné cestě.
Zavřete víko a blokujte mimo světlo.
Pro test vyberte správnou vlnovou délku.
Stiskněte tlačítko 'Read ' nebo 'měření '.
Počkejte, až displej zobrazí stabilní hodnotu absorbance.
Odstraňte kyvetu a opakujte pro každý vzorek.
Chcete -li zlepšit přesnost, vždy použijte Stejný spektrofotometr pro všechna měření ve vašem experimentu. Vyberte polotovar, který odpovídá rozpouštědlu vašeho vzorku. Udržujte koncentrace vzorků v lineárním rozsahu zákona o pivo-Lambert. Pokud je váš vzorek příliš koncentrovaný, zřeďte jej a změřte znovu. U speciálních vzorků můžete použít agenty odpovídající index refrakčního indexu nebo kyvety s krátkou cestou.
Přesné zaznamenávání dat je stejně důležité jako samotný experiment. Napište každé čtení do svého laboratorního notebooku nebo zadejte do tabulky. Zaznamenejte datum, čas, název vzorku, vlnová délka a hodnota absorbance. Pokud opakujete měření, uvědomte si, že to také.
Pomocí analýzy chyb zkontrolujte chyby.
Porovnejte své výsledky s předchozími běhy pomocí ovládacích grafů.
Použijte regresní analýzu, pokud chcete předpovědět koncentrace z absorbance.
Uchovávejte všechny záznamy kalibrace a ověření pro budoucí odkaz.
Tip: Než dokončíte, dvakrát zkontrolujte své položky. Přesné údaje vám pomohou zjistit trendy a podporují vaše závěry.
Statistické metody, jako jsou ANOVA a kontrolní grafy, ukazují, že pečlivé zaznamenávání dat vede k lepším a spolehlivějším výsledkům. Dobré záznamy vám také pomohou porovnat vaši práci s ostatními a v průběhu času zlepšovat techniku.
Sledováním této příručky budete ovládat základy použití spektrofotometru. Pečlivá příprava, nastavení, měření a záznam dat vám pomůže z každého experimentu co nejlépe.
Používáte absorbance k měření, kolik světla váš vzorek zabírá na určité vlnové délce. Když svítíte světlo přes roztok, prochází skrz nějaké světlo a některé se absorbují. Spektrofotometr vám dává číslo nazývané absorbance. Toto číslo vám řekne, kolik světla váš vzorek absorbuje. Absorbance je klíčovou součástí kvantitativní analýzy ve vědě.
Vztah mezi přenosem a absorbancem není lineární. Jak přenos klesá, absorbance rychle stoupá. Můžete to vidět v Tabulka níže : Absorbance
| přenosu (T) | (A) |
|---|---|
| 10% (0,1) | 1 od |
| 1% (0,01) | 2 od |
| 0,1% (0,001) | 3 od |
Vypočítáte absorbanci pomocí vzorce:
A = log₁₀ (i₀/i)
Zde je i₀ světlo před vzorkem a já je světlo po vzorku. Tato metoda vám poskytuje kvantitativní měření toho, kolik světla se vzorek absorbuje.
Zákon o pivo-Lambert spojuje absorbanci s koncentrací. Tento zákon používáte k zjištění, kolik látky je ve vašem vzorku. Vzorec je:
a = ε × c × p
a je absorbance, ε je molární absorptivita, C je koncentrace a p je délka dráhy kyvety. Tento zákon vám pomůže provádět kvantitativní práci v laboratoři.
Pro mnoho látek můžete použít zákon Beer-Lambert. Například můžete měřit Koncentrace bilirubinu kontrolou absorbance při 454 nm . Každá sloučenina absorbuje světlo na vlastní speciální vlnové délce. Díky tomu je Beer-Lambert Law mocným nástrojem pro kvantitativní analýzu.
Tip: Vždy udržujte délku dráhy a vlnovou délku pro všechny vaše vzorky. To udržuje vaše hodnoty absorbance přesné.
Koncentrace můžete vypočítat měřením absorbance a použitím zákona o pivo-Lambert. Nejprve připravte sadu standardů se známými koncentracemi. Změřte jejich hodnoty absorbance. Vynese graf absorbance versus koncentrace. Tento graf vám pomůže najít koncentraci neznámých vzorků.
Připravte svá řešení pečlivě pomocí kalibrovaných pipet a vyvážení.
Změřte absorbanci pro každý standardní a neznámý vzorek.
V případě potřeby aplikujte korekční faktory, například pro délku dráhy nebo driftu nástroje.
Vědci ukázali, že použití korekčních faktorů zvyšuje přesnost. V jedné studii vědci připravili roztoky acetonu a n-methyl-acetamidu se známými a neznámými koncentracemi. Zjistili, že při správných opravách jejich výsledky jejich koncentrace odpovídají zákonu piva-lambert do 20% . Bez korekce by chyby mohly být až 2,5krát vyšší než skutečná hodnota. To ukazuje, proč pečlivá technika záleží na kvantitativních výsledcích.
Pamatujte: Dobré záznamy a pečlivá měření vám pomohou získat pokaždé spolehlivé údaje o koncentraci.
Když používáte UV-vis spektroskopie, musíte si vybrat pravou Vlnová délka pro váš experiment . Nejlepší volbou je vlnová délka, kde váš vzorek ukazuje Nejvyšší absorbance, zvaná Lambda Max . To vám poskytne nejcitlivější výsledky v UV-vis spektrofotometrii. Pokud se jiná látka ve vzorku absorbuje na stejné vlnové délce, měli byste si vybrat jinou vlnovou délku s vysokou absorbance, ale bez rušení. Musíte také přemýšlet o rozpouštědle, pH vzorku a teplotě, protože tyto mohou změnit spektrum.
Můžete vidět, jak různá rozpouštědla blokují světlo na určitých vlnových délkách v níže uvedeném grafu. Například, Voda umožňuje UV-vis světlo přes 180 nm, zatímco aceton blokuje světlo pod 329 nm.
Když nastavíte experiment UV-vis spektrofotometrie, vždy se ujistěte, že vaše absorbance je mnohem vyšší než hluk nástroje. To vám pomůže získat přesné výsledky z vašeho spektra.
Lambda Max je bodem ve spektru, kde váš vzorek absorbuje nejvíce světla. V UV-Vis spektroskopii vám tato hodnota pomůže zjistit, jaký druh molekuly máte. Například karbonylové skupiny často ukazují a Vrchol mezi 270 a 300 nm , zatímco aromatické kruhy absorbují poblíž 250 až 280 nm. Pozice a výška vrcholu absorbance vám řeknou o struktuře a elektronických vlastnostech molekuly.
Vědci používají velké sady dat ke kontrole spolehlivosti hodnot Lambda Max. Dívají se na průměr, medián a šíření těchto hodnot pro mnoho sloučenin. Většina sloučenin má hodnoty Lambda Max, které spadají do úzkého rozmezí, což znamená, že data jsou stabilní a užitečná pro výuku a výzkum. Když porovnáte experimentální a počítačově předpokládaná spektra, uvidíte Asi 75% překrývání , což ukazuje, že Lambda Max je silným a spolehlivým rysem ve spektrofotometrii UV-vis.
V studentských laboratořích najdete mnoho aplikací pro UV-vis spektroskopii. Učitelé používají UV-vis spektrofotometrii, která vám pomůže dozvědět se o absorbanci, analýze spektra a výpočtech koncentrace. V jednom společném experimentu měříte množství aspirinu v tabletu. Studenti vytvářejí kalibrační křivku pomocí devíti standardů a jednoho prázdného, pokrývajícího rozsah od 0,00 do 0,48 mm. Většina studentů dosahuje vysokého R⊃2; Hodnota (≥ 0,995), což znamená, že jejich kalibrační křivka je velmi přesná.
| parametru | Hodnota / rozsah | Popis / význam |
|---|---|---|
| Počet kalibračních standardů | 9 | Studenti používají 9 standardů a 1 prázdné pro kalibraci v analýze aspirinu. |
| Koeficient stanovení (R⊃2;) | ≥ 0,995 | Ukazuje silnou linearitu v kalibračních křivkách. |
| Procentní rozdíl v kvantitaci aspirinu | 1,1% - 35,3% | Rozsah výsledků studentů ve srovnání s označeným obsahem aspirinu. |
| Průměrné hodnoty dovedností LS5 (skupina č. 2) | ≥ 4,30 (SD ≤ 0,82) | Označuje silné dovednosti studentů po praktické tréninku. |
Možná si všimnete určitých variací ve výsledcích, ale opakovaná praxe s UV-vis spektrofotometrií zlepšuje vaše dovednosti. Učitelé často používají poutavé praktické aktivity, které vám pomohou zvládnout výpočty čtení a absorbance spektra. Tyto aplikace spektrofotometrie způsobují, že věda je interaktivnější a pomáhá propojit teorii se skutečnými experimenty. Když se účastníte praktických laboratorních aktivit, budujete důvěru a naučíte se, jak používat UV-vis spektroskopii pro mnoho aplikací spektrofotometrie v chemii, biologii a environmentální vědě.
Po dokončení měření uvidíte čísla a někdy graf na displeji spektrofotometru. Musíte vědět, co tyto výsledky znamenají. Hlavní číslo, které hledáte, je absorbance. Tato hodnota vám řekne, kolik světla se váš vzorek absorboval na určité vlnové délce. Pokud vidíte graf, osa y vykazuje absorbanci a osa x vykazuje vlnovou délku.
Chcete -li pochopit vaše data, postupujte podle těchto kroků:
Zkontrolujte, zda vaše hodnoty absorbance spadají do očekávaného rozsahu. Většina spektrofotometrů funguje nejlépe, když je absorbance mezi 0,1 a 1,0.
Hledejte hladkou křivku nebo čáru na grafu. Náhlé skoky nebo kapky mohou znamenat problém s vaším vzorkem nebo nástrojem.
Porovnejte své výsledky s prázdnými a standardy. To vám pomůže zjistit, zda se váš vzorek chová podle očekávání.
Tip: Validační studie ukazují, že své výsledky můžete důvěřovat, když zkontrolujete přesnost, přesnost a linearitu. Vědci testují několik koncentrací a měření opakování po mnoho dní, aby se zajistilo, že spektrofotometr poskytuje spolehlivá data. Používají grafy a regresní analýzu ke kontrole, zda hodnoty absorbance odpovídají očekávanému vzoru.
Na grafu spektrofotometru často vidíte jeden nebo více vrcholů. Každý vrchol ukazuje, kde váš vzorek absorbuje nejvíce světla. Nejvyšší bod vrcholu se nazývá vrchol. Tyto vrcholy používáte k dozvědět se o chemikáliích ve vašem vzorku.
Zde je způsob, jak můžete identifikovat a analyzovat vrcholy:
Najít místní maxima na vašem grafu. Toto jsou nejvyšší body nad základní linií.
Označte start a konec každého vrcholu. Můžete to udělat hledáním, kde křivka stoupá a spadne zpět dolů.
Změřte výšku a plochu každého vrcholu. Oblast pod vrcholem vám řekne, kolik látky je přítomna.
Porovnejte polohu píku (vlnové délky) se známými hodnotami. To vám pomůže identifikovat chemickou látku.
Identifikace vrcholu využívá výšku i oblast, aby vám poskytla jasný obrázek. Vědci používají algoritmy k nalezení startu, vrcholu a konce každého vrcholu, i když jsou data hlučná. Oblast pod vrcholem dává dobrou míru toho, kolik analytu je ve vašem vzorku. Tato čísla můžete použít k porovnání různých vzorků nebo ke kontrole čistoty.
Poznámka: The Maximální intenzita píku a celkové plochy vám pomůže detekovat a přiřadit píky správně, dokonce i ve složitých směsích.
Vaše výsledky někdy nevypadají správně. Můžete vidět podivné vrcholy, nízkou absorbanci nebo hlučná data. Mnoho problémů můžete opravit kontrolou několika klíčových bodů.
Ujistěte se, že vaše kyvety jsou čisté a bez poškrábání.
Zkontrolujte, zda jste použili správné polotovary a že odpovídá vašemu vzorkovému rozpouštědlu.
Potvrďte, že spektrofotometr je kalibrován a zahříván.
Podívejte se na svůj vzorek pro bubliny nebo částice, které by mohly blokovat světlo.
Statistiky můžete použít k nalezení problémů. Například několikrát změřte absorbanci prázdného a vypočítejte standardní odchylku. Pokud se vaše prázdné hodnoty hodně liší, může váš nástroj potřebovat údržbu. The Limit detekce vám říká nejmenší signál, kterému můžete důvěřovat. Najdete to vynásobením standardní odchylky prázdného o třemi a dělením sklonem kalibrační křivky. Pokud je absorbance vašeho vzorku pod tímto limitem, nemusíte mít dostatek látky k měření.
| Problém | Možné příčiny | řešení |
|---|---|---|
| Hlučná základní linie | Špinavá kyveta, bubliny | Vyčistěte kyvetu, odstraňte bubliny |
| Nízká absorbance | Vzorek příliš zředěný | Zvýšit koncentraci |
| Neočekávané vrcholy | Kontaminace, nesprávná prázdná | Použijte čerstvý vzorek a prázdný |
| Špatná linearita | Chyba kalibrace | Rekalibrace nástroje |
Pamatujte: Dobré odstraňování problémů používá pečlivé pozorování i jednoduché statistiky. Kontrola standardní odchylky a limit detekce vám pomůže zjistit chyby a zlepšit vaše výsledky.
Budováním silné laboratorní dovednosti sledujete každý krok ve spektrofotometrii. Výuka začíná pečlivou přípravou a kalibrací vzorku. Používáte Zákon o pivo-Lambert pro spojování absorbance a koncentrace, což vám pomůže získat přesné výsledky. Výuka také znamená kontrolu vašich dat s Grafy a statistiky , takže vidíte trendy a chyby. Když praktikujete výuku těchto kroků, zjistíte, jak změny koncentrace ovlivňují vaše výsledky. Výuka spektrofotometrie vám dává důvěru a připravuje vás na pokročilejší vědeckou práci.
Nejprve zkontrolujte napájení a připojení. Ujistěte se, že víko je zavřené. Pokud chyba zůstane, přečtěte si příručku pro kroky odstraňování problémů. O pomoc můžete také požádat svého učitele nebo vedoucího laboratoře.
Ne, měli byste vyrovnat mezeru s rozpouštědlem vašeho vzorku. Pokud váš vzorek používá vyrovnávací paměť nebo alkohol, použijte stejnou kapalinu jako vaše prázdné. To udržuje vaše výsledky přesné.
Kalibrace nastavuje základní hodnotu pro vaše hodnoty. Odstraníte signály na pozadí a opravíte drift nástroje. Tento krok vám pomůže získat pokaždé spolehlivé a opakovatelné výsledky.
Škrábané nebo špinavé kyvette rozptýlí světlo. To může způsobit falešné hodnoty absorbance. Než je použijete, vždy vyčistěte své kyvety a zkontrolujte škrábance.
