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Vistas: 5210 Autor: El editor de sitios Publicar Tiempo: 2025-06-19 Origen: Sitio
Un espectrofotómetro te permite Mida cuánta luz absorbe una muestra a una cierta longitud de onda. Cuando usa la espectrofotometría, obtiene habilidades que ayudan en muchos campos científicos. Esta guía simplifica la espectroscopía al mostrarle cómo usar herramientas de enseñanza y experimentos reales. Verá que la enseñanza con un espectrofotómetro admite Resultados precisos , pruebas no destructivas y aprendizaje práctico de espectroscopía. La enseñanza de las habilidades de espectroscopía de estudiantes lo ayuda a explorar la química, las ciencias ambientales y más. La espectrofotometría y la espectroscopía desempeñan papeles clave en la enseñanza de los conceptos básicos de ciencias.
Un espectrofotómetro mide cuánta luz absorbe una muestra, lo que lo ayuda a encontrar concentraciones químicas de manera fácil y precisa.
La configuración adecuada, la calibración y la preparación de la muestra son esenciales para obtener resultados confiables y consistentes de su espectrofotómetro.
Use cuillas limpias y claras y manejalas cuidadosamente para evitar errores causados por huellas digitales o rasguños.
Siga reglas de seguridad como usar gafas y guantes, y mantenga su espacio de trabajo limpio para protegerse y sus datos.
Aprenda a leer los valores de absorbancia y los espectros cuidadosamente, verifique las curvas suaves y los picos esperados, y solucione problemas comunes para mejorar sus experimentos.
La espectrofotometría es un método que utiliza Mida cuánta luz absorbe una sustancia . Cuando brilla la luz a través de una solución, pasa parte de la luz y algunas son absorbidas por las moléculas en el interior. Este proceso lo ayuda a descubrir cuánto de cierto químico está presente. La espectrofotometría funciona con diferentes tipos de luz, incluyendo UV-Vis e infrarrojos. Puede usarlo para estudiar muchas cosas, como la cantidad de azúcar en una bebida o la concentración de un medicamento. La idea principal es simple: cuantas más moléculas absorban la luz, menos luz sale al otro lado.
La espectrofotometría le brinda una forma de recopilar datos cuantitativos. Por ejemplo, puedes Medir concentraciones de microgramos a gramos por decilitro . Esto lo hace útil en química, biología e incluso laboratorios clínicos.
Un espectrofotómetro es la herramienta que utiliza para la espectrofotometría. Brilla la luz a una longitud de onda específica a través de su muestra. Dentro del instrumento, encuentras un Fuente de luz, un monocromador para elegir la longitud de onda derecha, una cubeta para sostener su muestra y un detector para medir cuánta luz pasa. El detector le muestra cuánta luz absorbe la muestra. Si su muestra tiene un cromóforo, absorbe la luz a ciertas longitudes de onda, que el espectrofotómetro puede detectar.
El instrumento mide la absorción de luz y la transmisión.
El valor de absorbancia le dice cuánta luz absorbe la muestra.
El valor de la transmisión muestra cuánta luz pasa.
Aquí hay una tabla que muestra cómo La absorbancia y la transmisión relacionan :
| transmisión (%) | Absorbancia (a) |
|---|---|
| 100 | 0 |
| 50 | 0.301 |
| 10 | 1.0 |
| 5 | 1.301 |
| 1 | 2.0 |
| 0.1 | 3.0 |
Utiliza espectrofotometría y espectroscopía en muchos campos científicos. En la espectroscopía UV-vis, puede estudiar cómo los cromóforos en una muestra absorben la luz a diferentes longitudes de onda. Esto le ayuda a analizar la composición química y el progreso de la reacción. La espectrofotometría te permite Mida cosas como la actividad enzimática, la calidad de los alimentos e incluso los marcadores de enfermedades en la sangre. En el aula, usando la espectrofotometría UV-vis Conecta lo que aprende en teoría a experimentos reales . Obtiene práctica práctica y ves cómo la absorción de luz cambia con diferentes muestras.
La espectroscopía y la espectrofotometría hacen que la ciencia sea más interactiva.
Aprende a usar instrumentos reales y comprender los datos.
Estas habilidades lo ayudan en química, biología y ciencia material.
Necesita una fuente de luz fuerte para comenzar su experimento UV-VIS. La fuente de luz brilla a través de su muestra y cubre un amplio espectro. Diferentes lámparas funcionan para diferentes partes del espectro. Por ejemplo, Las lámparas de deuterio cubren el rango UV de 190 a 370 nm , mientras que las lámparas de halógeno de tungsteno funcionan para el espectro visible de 320 a 1100 nm. Las lámparas de flash de xenón y los LED pueden cubrir los rangos UV y visibles. El monocromador divide la luz en una banda estrecha, por lo que puede elegir la longitud de onda exacta que desee estudiar en el espectro. El El ancho de hendidura del monocromador controla cuán nítido aparece su espectro . Las hendiduras estrechas le dan una mejor resolución, pero menos luz. Las rendijas más anchas dejan entrar más luz, pero el espectro se vuelve menos claro. Aquí hay una tabla que muestra algunos detalles técnicos comunes: especificación
| de componentes | / datos numéricos |
|---|---|
| Fuentes de luz | Deuterium: UV (190–370 nm), vida útil ~ 100 hr |
| Halógeno de tungsteno: VIS (320–1100 nm), vida útil ~ 3000 hr | |
| Lámparas de flash de xenón: UV/Vis (190–1100 nm), vida útil ~ 3000 h. | |
| LED: espectro estable, vida útil> 100,000 hr | |
| Monocromadores | Use prismas o rejillas de difracción para dividir longitudes de onda de luz |
| Resolución de control de ancho de hendidura | |
| Ancho de banda espectral | Fijo o variable (por ejemplo, 0.5 a 5 nm) |
Consejo: Para estudios UV-VIS, siempre verifique el tipo de lámpara y el ancho de hendidura para que coincidan con sus necesidades de espectro.
Usted coloca su muestra en una cubeta, que se encuentra en el soporte de la muestra. La cubeta debe ser clara para dejar pasar el espectro. Para mediciones UV-vis, Las cubetas de cuarzo funcionan mejor porque dejan pasar . Las cubetas de plástico o vidrio pueden bloquear partes del espectro UV, lo que puede cambiar sus resultados. La longitud de la ruta de la cubeta afecta cuánta luz absorbe la muestra. Las longitudes de camino más largas aumentan la absorbancia, lo que ayuda cuando tiene una muestra de baja concentración. Las longitudes de ruta más cortas ayudan cuando su muestra está muy concentrada. También debe llenar la cubeta al nivel correcto, por lo que el espectro pasa a través de toda la muestra. Si usa la cubeta incorrecta o la llena incorrectamente, las lecturas de sus espectrofotómetro no serán precisas.
Después de que el espectro pasa a través de su muestra, el detector mide cuánta luz sale. Los espectrofotómetros modernos utilizan detectores sensibles que pueden captar pequeños cambios en el espectro. Estos detectores funcionan rápidamente y pueden medir Pequeños cambios de absorbancia, incluso tan bajo como 0.0001 . La pantalla muestra sus resultados, a menudo como un gráfico del espectro o como valores de absorbancia a diferentes longitudes de onda. Puede ver picos en el espectro que le informan sobre la muestra. Los detectores y pantallas de alta calidad lo ayudan a obtener datos UV-VIS confiables. Cuando se concentra en comprender la instrumentación, puede confiar en sus resultados y detectar cualquier problema rápidamente.
Antes de comenzar cualquier experimento, debe seguir reglas de seguridad. Estas reglas lo protegen y lo ayudan a obtener resultados confiables. Siempre use gafas y guantes de seguridad al manejar productos químicos o muestras. Mantenga su espacio de trabajo limpio y seco. Nunca coma ni beba cerca del espectrofotómetro.
Consejo: maneje las cubetas por los lados esmerilados para evitar huellas digitales en las superficies claras. Las huellas digitales pueden cambiar sus lecturas.
Una mirada a los datos de laboratorio muestra por qué la seguridad y la técnica adecuada son importantes. En las pruebas de la Facultad de Patólogos Americanos, hasta La variación del 22% en las lecturas de absorbancia apareció en los laboratorios. Incluso después de eliminar los laboratorios con equipos defectuosos, la variación se mantuvo en un 15%. Esta tabla muestra los números: número
| de año | de laboratorios | coeficiente máximo de variación (CV) en | notas de absorbancia (%) |
|---|---|---|---|
| 1973 | 132 | 22 | Prueba inicial que muestra una alta variabilidad |
| 1974 | 135 | 15 | Después de excluir 24 laboratorios con> 1% de luz callejera |
| 1974 | 24 (laboratorios excluidos) | Hasta 11 (CV en transmitancia) | Laboratorios con> 1% de luz callejera que causa errores |
Estos resultados muestran que la seguridad, la calibración adecuada y el manejo cuidadoso reducen los errores. Siempre siga la guía de su maestro o supervisor de laboratorio para el uso de espectrofotómetro seguro.
Debe configurar y calibrar el espectrofotómetro antes de medir algo. Este paso asegura que sus lecturas sean correctas. Siga esta guía para la configuración y la calibración:
Encienda el espectrofotómetro y déjelo Calienta por al menos 45 minutos . Esto ayuda al instrumento a estabilizarse.
Elija la longitud de onda que necesita para su experimento. Verifique el manual para la configuración recomendada, como 465 nm.
Coloque un blanco (una cubeta llena de solvente o búfer) en el soporte de muestra. Cierre la tapa y configure la pantalla en cero. Este paso elimina las señales de fondo.
Insertar un Estándar de calibración que coincide con el tipo de muestra que probará. Grabe la lectura.
Compare su lectura con el valor en el certificado de calibración. Si los números no coinciden, verifique la tolerancia del instrumento y la incertidumbre del estándar.
Si encuentra un problema, pruebe el estándar en otro espectrofotómetro para ver si el problema está con el instrumento o el estándar.
Repita la calibración al menos cada ocho horas o cuando la temperatura ambiente cambia más de 5 ° C.
Nota: Mantenga el espectrofotómetro lejos de la luz solar directa y los cambios de temperatura. Las condiciones estables lo ayudan a obtener resultados precisos.
La buena preparación de muestras es clave para obtener datos confiables. Debe seguir una guía para cada paso para evitar errores. Estas son las mejores prácticas para la preparación de la muestra:
Recoja su muestra con herramientas y contenedores limpios.
Almacene las muestras a la temperatura correcta y protejalas de la luz si es necesario.
Homogeneizar la muestra para que sea uniforme. Este paso reduce los errores.
Filtre o centrifuge la muestra para eliminar partículas que puedan bloquear la luz.
Ajuste la concentración para que se ajuste dentro del rango de detección del espectrofotómetro.
Establezca el pH si su experimento lo requiere.
Use espacios en blanco y duplicados para verificar la consistencia.
Escriba cada paso de su cuaderno de laboratorio.
Consejo: siempre use el mismo tipo de cubeta para todas las muestras y espacios en blanco. Esto mantiene sus resultados consistentes.
Los investigadores han encontrado que la preparación cuidadosa, como filtrar y ajustar la concentración, conduce a resultados más precisos y repetibles. Los pasos de control de calidad, como el uso de espacios en blanco y duplicados, lo ayudan a detectar problemas temprano.
Ahora está listo para medir su muestra. Esta guía lo ayudará a obtener los mejores resultados:
Limpie la cubeta con un tejido sin pelusa para eliminar el polvo o las huellas digitales.
Coloque la cubeta en el soporte con los lados transparentes frente a la ruta de la luz.
Cierre la tapa para bloquear la luz exterior.
Seleccione la longitud de onda correcta para su prueba.
Presione el botón 'Read ' o 'Medir '.
Espere a que la pantalla muestre un valor de absorbancia estable.
Retire la cubeta y repita para cada muestra.
Para mejorar la precisión, use siempre el El mismo espectrofotómetro para todas las mediciones en su experimento. Elija un espacio en blanco que coincida con el solvente de su muestra. Mantenga las concentraciones de muestra dentro del rango lineal de la Ley de Beer-Lambert. Si su muestra está demasiado concentrada, diluya y mida nuevamente. Para muestras especiales, puede usar agentes de coincidencia de índice de refracción o cubetas de longitud de ruta corta.
El registro de datos preciso es tan importante como el experimento en sí. Escriba cada lectura en su cuaderno de laboratorio o ingrese en una hoja de cálculo. Registre la fecha, la hora, el nombre de la muestra, la longitud de onda y el valor de absorbancia. Si repite una medición, tenga en cuenta que también.
Use el análisis de errores para verificar los errores.
Compare sus resultados con ejecuciones anteriores utilizando gráficos de control.
Use el análisis de regresión si desea predecir concentraciones de la absorbancia.
Mantenga todos los registros de calibración y validación para referencia futura.
Consejo: Verifique sus entradas antes de terminar. Los datos precisos lo ayudan a detectar tendencias y respalda sus conclusiones.
Los métodos estadísticos como ANOVA y cuadros de control muestran que el registro de datos cuidadoso conduce a resultados mejores y más confiables. Los buenos registros también lo ayudan a comparar su trabajo con los demás y mejorar su técnica con el tiempo.
Siguiendo esta guía, dominará los conceptos básicos del uso del espectrofotómetro. La preparación cuidadosa, la configuración, la medición y el registro de datos lo ayudan a aprovechar al máximo cada experimento.
Utiliza la absorbancia para medir cuánta luz toma su muestra a una cierta longitud de onda. Cuando brilla la luz a través de una solución, pasa algo de luz y otros se absorben. El espectrofotómetro le brinda un número llamado absorbancia. Este número le dice cuánta luz absorbe su muestra. La absorbancia es una parte clave del análisis cuantitativo en la ciencia.
La relación entre transmisión y absorbancia no es lineal. A medida que cae la transmisión, la absorbancia aumenta rápidamente. Puedes ver esto en el Tabla a continuación : Absorbancia
| de transmisión (t) | (a) |
|---|---|
| 10% (0.1) | 1 OD |
| 1% (0.01) | 2 OD |
| 0.1% (0.001) | 3 OD |
Calcula la absorbancia usando la fórmula:
A = log₁₀ (i₀/i)
Aquí, i₀ es la luz antes de la muestra, y yo es la luz después de la muestra. Este método le brinda una medición cuantitativa de cuánta luz absorbe su muestra.
La ley de Beer-Lambert conecta la absorbancia con la concentración. Utiliza esta ley para averiguar cuánto de una sustancia hay en su muestra. La fórmula es:
a = ε × c × p
a es absorbancia, ε es la absorción molar, c es la concentración y p es la longitud del camino de la cubeta. Esta ley lo ayuda a hacer un trabajo cuantitativo en el laboratorio.
Puede usar la Ley de Beer-Lambert para muchas sustancias. Por ejemplo, puede medir el concentración de bilirrubina verificando la absorbancia a 454 nm . Cada compuesto absorbe la luz en su propia longitud de onda especial. Esto hace que la Ley de Beer-Lambert sea una herramienta poderosa para el análisis cuantitativo.
Consejo: siempre mantenga la longitud del camino y la longitud de onda de la misma manera para todas sus muestras. Esto mantiene sus lecturas de absorbancia precisas.
Puede calcular la concentración midiendo la absorbancia y el uso de la ley de Beer-Lambert. Primero, prepare un conjunto de estándares con concentraciones conocidas. Medir sus valores de absorbancia. Gráfico de un gráfico de absorbancia versus concentración. Este gráfico le ayuda a encontrar la concentración de muestras desconocidas.
Prepare sus soluciones cuidadosamente utilizando pipetas y equilibrios calibrados.
Mida la absorbancia para cada muestra estándar y desconocida.
Aplique factores de corrección si es necesario, como para la longitud de la ruta o la deriva del instrumento.
Los investigadores han demostrado que el uso de factores de corrección mejora la precisión. En un estudio, los científicos prepararon soluciones de acetona y n-metil-acetamida con concentraciones conocidas y desconocidas. Descubrieron que, con correcciones adecuadas, sus resultados de concentración coincidían con la Ley de Beer-Lambert dentro del 20% . Sin correcciones, los errores podrían ser tan altos como 2.5 veces el valor verdadero. Esto muestra por qué la técnica cuidadosa es importante para los resultados cuantitativos.
Recuerde: los buenos registros y las mediciones cuidadosas lo ayudan a obtener datos de concentración confiables cada vez.
Cuando usa la espectroscopía UV-vis, debe elegir la derecha longitud de onda para su experimento . La mejor opción es la longitud de onda donde su muestra muestra la La mayor absorbancia, llamada Lambda Max . Esto le brinda los resultados más sensibles en la espectrofotometría UV-vis. Si otra sustancia en su muestra absorbe a la misma longitud de onda, debe elegir una longitud de onda diferente con alta absorbancia pero sin interferencia. También debe pensar en el solvente, el pH y la temperatura de la muestra porque pueden cambiar el espectro.
Puede ver cómo los diferentes solventes bloquean la luz en ciertas longitudes de onda en la tabla a continuación. Por ejemplo, El agua permite que UV-vis sea hasta 180 nm, mientras que la acetona bloquea la luz por debajo de 329 nm.
Cuando configure su experimento de espectrofotometría UV-VIS, siempre asegúrese de que su lectura de absorbancia sea mucho más alta que el ruido del instrumento. Esto le ayuda a obtener resultados precisos de su espectro.
Lambda Max es el punto en el espectro donde su muestra absorbe la mayor luz. En la espectroscopía UV-vis, este valor lo ayuda a identificar qué tipo de molécula tiene. Por ejemplo, los grupos carbonilo a menudo muestran un Pico entre 270 y 300 nm , mientras que los anillos aromáticos absorben cerca de 250 a 280 nm. La posición y la altura del pico de absorbancia le informan sobre la estructura de la molécula y las propiedades electrónicas.
Los científicos usan grandes conjuntos de datos para verificar la confiabilidad de los valores de Lambda Max. Miran la promedio, mediana y la propagación de estos valores para muchos compuestos. La mayoría de los compuestos tienen valores de Lambda Max que caen dentro de un rango estrecho, lo que significa que los datos son estables y útiles para la enseñanza y la investigación. Cuando compara espectros experimentales y predichos por computadora, ves Alrededor del 75% se superpone , que muestra que Lambda Max es una característica fuerte y confiable en la espectrofotometría UV-vis.
Encontrará muchas aplicaciones para la espectroscopía UV-vis en los laboratorios de estudiantes. Los maestros usan espectrofotometría UV-vis para ayudarlo a aprender sobre la absorbancia, el análisis del espectro y los cálculos de concentración. En un experimento común, mide la cantidad de aspirina en una tableta. Los estudiantes crean una curva de calibración utilizando nueve estándares y una en blanco, cubriendo un rango de 0.00 a 0.48 mm. La mayoría de los estudiantes logran un alto R⊃2; Valor (≥ 0.995), lo que significa que su curva de calibración es muy precisa. Valor
| del parámetro | / rango | Descripción / importancia |
|---|---|---|
| Número de estándares de calibración | 9 | Los estudiantes usan 9 estándares y 1 en blanco para la calibración en el análisis de aspirina. |
| Coeficiente de determinación (R⊃2;) | ≥ 0.995 | Muestra una fuerte linealidad en las curvas de calibración. |
| Porcentaje de diferencia en la cuantificación de aspirina | 1.1% - 35.3% | Rango de resultados de los estudiantes en comparación con el contenido de aspirina etiquetado. |
| Habilidad LS5 Valores medios (Grupo #2) | ≥ 4.30 (DE ≤ 0.82) | Indica fuertes habilidades de los estudiantes después de la práctica práctica. |
Puede notar alguna variación en los resultados, pero la práctica repetida con espectrofotometría UV-vis mejora sus habilidades. Los maestros a menudo usan actividades prácticas atractivas para ayudarlo a dominar los cálculos de lectura y absorbancia del espectro. Estas aplicaciones de espectrofotometría hacen que la ciencia sea más interactiva y lo ayudan a conectar la teoría con experimentos reales. Cuando participa en actividades prácticas de laboratorio, crea confianza y aprende a usar la espectroscopía UV-VIS para muchas aplicaciones de espectrofotometría en química, biología y ciencias ambientales.
Cuando termina su medición, ve números y, a veces, un gráfico en la pantalla del espectrofotómetro. Necesita saber qué significan estos resultados. El número principal que busca es la absorbancia. Este valor le dice cuánta luz ha absorbido su muestra a una cierta longitud de onda. Si ve un gráfico, el eje y muestra absorbancia y el eje X muestra la longitud de onda.
Para dar sentido a sus datos, siga estos pasos:
Verifique que sus valores de absorbancia se encuentren dentro del rango esperado. La mayoría de los espectrofotómetros funcionan mejor cuando la absorbancia es entre 0.1 y 1.0.
Busque una curva o línea suave en su gráfico. Los saltos o gotas repentinas pueden significar que hay un problema con su muestra o instrumento.
Compare sus resultados con su espacio en blanco y estándares. Esto le ayuda a ver si su muestra se comporta como se esperaba.
Consejo: Los estudios de validación muestran que puede confiar en sus resultados cuando verifica la precisión, la precisión y la linealidad. Los científicos prueban varias concentraciones y se repiten mediciones durante muchos días para asegurarse de que el espectrofotómetro proporcione datos confiables. Utilizan gráficos y análisis de regresión para verificar si los valores de absorbancia coinciden con el patrón esperado.
A menudo ve uno o más picos en su gráfico de espectrofotómetro. Cada pico muestra dónde su muestra absorbe la mayor cantidad de luz. El punto más alto de un pico se llama ápice. Utiliza estos picos para aprender sobre los productos químicos en su muestra.
Así es como puede identificar y analizar picos:
Encontrar el Maxima local en su gráfico. Estos son los puntos más altos por encima de la línea de base.
Marque el inicio y el final de cada pico. Puede hacer esto buscando dónde se eleva la curva y se baja.
Mida la altura y el área de cada pico. El área debajo del pico le dice cuánto de una sustancia está presente.
Compare la posición del pico (longitud de onda) con los valores conocidos. Esto le ayuda a identificar el químico.
La identificación máxima utiliza tanto la altura como el área para darle una imagen clara. Los científicos usan algoritmos para encontrar el inicio, el ápice y el final de cada pico, incluso cuando los datos son ruidosos. El área bajo el pico da una buena medida de cuánto del analito está en su muestra. Puede usar estos números para comparar diferentes muestras o para verificar la pureza.
Nota: el La intensidad máxima de un pico y el área total lo ayudan a detectar y asignar picos correctamente, incluso en mezclas complejas.
A veces, sus resultados no se ven bien. Puede ver picos extraños, baja absorbancia o datos ruidosos. Puede solucionar muchos problemas revisando algunos puntos clave.
Asegúrese de que sus cubetas estén limpias y libres de rasguños.
Compruebe que usó el blanco correcto y que coincida con su solvente de muestra.
Confirme que el espectrofotómetro se calibra y se calienta.
Mire su muestra en busca de burbujas o partículas que puedan bloquear la luz.
Puede usar estadísticas para ayudar a encontrar problemas. Por ejemplo, mida la absorbancia de su blanco varias veces y calcule la desviación estándar. Si sus lecturas en blanco varían mucho, su instrumento puede necesitar mantenimiento. El El límite de detección le dice la señal más pequeña en la que puede confiar. Encuentra esto multiplicando la desviación estándar del blanco por tres y dividiendo por la pendiente de su curva de calibración. Si la absorbancia de su muestra está por debajo de este límite, es posible que no tenga suficiente sustancia para medir.
| Problema | posible | Solución de causa |
|---|---|---|
| Línea de base ruidosa | Cubeta sucia, burbujas | Limpie la cubeta, retire las burbujas |
| Baja absorbancia | Muestra demasiado diluido | Aumentar la concentración |
| Picos inesperados | Contaminación, en blanco equivocado | Use una muestra fresca y en blanco |
| Mala linealidad | Error de calibración | Recalibrar instrumento |
Recuerde: una buena resolución de problemas utiliza una observación cuidadosa y estadísticas simples. Verificar la desviación estándar y el límite de detección lo ayuda a detectar errores y mejorar sus resultados.
Desarrolla fuertes habilidades de laboratorio siguiendo cada paso en espectrofotometría. La enseñanza comienza con una cuidadosa preparación de muestras y calibración. Usas el La ley de Beer-Lambert para conectar la absorbancia y la concentración, lo que lo ayuda a obtener resultados precisos. Enseñar también significa verificar sus datos con Gráficos y estadísticas , para que vea tendencias y errores spot. Cuando practica enseñar estos pasos, aprende cómo los cambios de concentración afectan sus resultados. La espectrofotometría de enseñanza le brinda confianza y lo prepara para un trabajo de ciencias más avanzado.
Primero, verifique la alimentación y las conexiones. Asegúrese de que la tapa esté cerrada. Si el error permanece, lea el manual para los pasos de solución de problemas. También puede pedirle ayuda a su maestro o supervisor de laboratorio.
No, debe coincidir con el en blanco con el solvente de su muestra. Si su muestra usa un amortiguador o alcohol, use el mismo líquido que el espacio en blanco. Esto mantiene sus resultados precisos.
La calibración establece una línea de base para sus lecturas. Elimina las señales de fondo y corrige la deriva del instrumento. Este paso lo ayuda a obtener resultados confiables y repetibles cada vez.
Una cubeta rayada o sucia dispersa la luz. Esto puede causar lecturas de absorbancia falsas. Siempre limpie sus cubetas y verifique los rasguños antes de usarlos.
